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                          行業資訊丨TrypLE和Trypsin的對比以及TrypLE的檢測

                          TrypLETrypsin的對比以及TrypLE的檢測

                          胰酶消化的細節,你知道多少?

                          細胞學實驗中我們除了遇到污染的難題之外,消化的問題,也不容小覷。消化不好,就會導致細胞狀態變差,甚至死亡。尤其是在某些需要無血清培養的貼壁細胞中,可以嘗試用 TrypLE消化細胞,因為TrypLE不需要胰酶抑制劑終止消化,直接用PBS稀釋終止消化就可以了。這樣避免了與血清的直接接觸,血清中的復雜成分也不會干擾細胞潛在的生理功能,改變細胞分裂的正常狀態,對于一些敏感細胞來說,這個改變是致命的。

                          有科學家稱,在培養某種上皮細胞時,一開始用trypsin消化血清終止之后,細胞還是正常生長的,但是發現細胞消化重懸之后細胞貼壁,但是不變形,總是以為消化時間過長導致的;后來降低了消化時間,情況未改觀,并且一次比一次明顯;到最后,細胞附著在培養瓶底部、球形、一直不變形;而變了形的細胞,狀態和之前的完全不一樣,好像變成了另外一種細胞,最后很快就死亡了。后來更換使用了TrypLE,情況發生好轉,因為不需要用血清終止消化,只需要用PBS終止消化就可以了,細胞生長狀態明顯變好。

                          讓我們看一下TrypLETrypsin具體各有什么優缺點吧。

                          Trypsin的缺點:

                          細胞損傷大--Trypsin抑制劑需要將酶快速滅活,這會導致細胞損失或死亡。

                          需冷凍保存--Trypsin必須保存在-20 ℃,在經過多次反復凍融或在4 ℃長期保存后,穩定性喪失。

                          批間差異大--Trypsin為動物源性,批次之間差異性大。

                          TrypLE的優勢

                          細胞損傷?。?/span>TrypLE為非動物源性的消化酶,更純,對細胞損傷更小,提高種板效率。因為TrypLE作用細胞溫和,不需要 Trypsin酶抑制劑。

                          穩定性很高--TrypLE可以穩定的保存于室溫,節省了冷凍空間,同時提供即時可用的便利。

                          應用范圍廣--TrypLE是在有血清或無血清環境中培養的多種不同細胞系的理想選擇,可以直接替代您現有步驟中所用的0.25% trypsin EDTA試劑。

                          TrypLE的超高穩定性

                          TrypLE表現的動力學及剪切特異性與 Trypsin 非常近似,而其穩定性卻比前者有明顯提高。工作儲存溫度可以為室溫保存6個月或37℃一周后酶活性仍不丟失。TrypLE試劑的純度比Trypsin高,室溫穩定性比較高。

                          所以,TrypLE就相當于某些無血清生長的貼壁細胞的救星啦!

                          TrypLE檢測

                          在單抗藥物、疫苗類藥物以及細胞治療藥物等生產中, TrypLE已經廣泛的被使用來對貼壁細胞進行消化。生物制品生產相關法規中明確了細胞培養時添加物(如TrypLE、核酸酶、BSA等)檢測的必要性,故TrypLE的殘留量檢測也愈發引起重視。

                          君研生物自主研發的重組胰蛋白酶類似物定量檢測試劑盒可以有效,快速,便捷地檢測各種樣品中TrypLE的殘留量。

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